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上篇 噬菌体表面展示技术原理及其操作指南第1章 概述3

一、噬菌体表面展示随机肽库3

二、噬菌体抗体库7

三、噬菌体表面展示技术筛选原理和基本方法11

四、噬菌体表面展示技术的应用12

第2章 噬菌体表面展示肽库技术操作指南17

一、试剂17

二、实验步骤18

三、影响筛选的因素21

四、结果判断和分析24

第3章 噬菌体肽库构建及筛选实例26

实例1 基于昆虫防御素A蛋白分子的噬菌体展示构象肽库的构建26

实例2 重组hTNF-α结合肽的筛选31

实例3 马抗SARS-CoV多抗抗原表位的筛选36

第4章 噬菌体抗体库技术操作指南47

一、试剂47

二、实验步骤48

三、影响筛选的因素53

第5章 噬菌体抗体库构建及筛选实例55

一、引物56

二、淋巴细胞总RNA的提取及VH和VL基因的扩增57

三、初级噬菌体抗体库的构建57

四、通过Cre-loxP位点特异性重组构建大容量噬菌体抗体库58

五、噬菌体抗体库的筛选59

六、噬菌体抗体的鉴定及序列分析60

下篇 SELEX技术原理及其操作指南63

第1章 概述63

一、SELEX技术的基本技术路线63

二、SELEX筛选的特点66

三、SELEX的应用67

四、适配子的改造71

第2章 SELEX技术操作指南75

一、试剂与设备75

二、文库／文库模板和引物的设计与合成76

三、RNA文库的获得（PCR、体外转录与RNA回收）79

四、文库与靶分子孵育82

五、结合寡核苷酸分子的分离83

六、反转录86

七、PCR87

八、下一轮筛选用文库的制备88

九、重复筛选90

十、筛选后获得的特异aptamer的分析90

第3章 SELEX技术筛选实例93

实例1 牛凝血酶特异的RNA aptamer的筛选93

实例2 CE-SELEX筛选技术103

实例3 亲和层析SELEX筛选促红细胞生成素适配体及基于分子信标检测方法的建立111

实例4 亲和层析SELEX筛选相思子毒素适配体及其在分析检测中的应用117

实例5 以完整细胞为靶的消减SELEX筛选123

实例6 肿瘤组织切片-SELEX技术筛选临床标本分子探针132

实例7 组合aptamer用于金黄色葡萄球菌检测的研究140