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第一章 电子显微镜概述1

第一节 电镜发展简史1

一、光学显微镜的极限分辨率1

二、电镜的研制历程3

第二节 电镜的类型及其展望5

一、电镜类型介绍5

二、展望11

第二章 电子显微镜的用途12

第一节 透射电镜在生命科学中的应用12

一、细胞学12

二、发现和识别病毒13

三、临床病理诊断14

四、微生物学14

五、免疫学15

六、细胞化学16

第二节 透射电镜在材料科学中的应用16

一、纳米材料的分析鉴定17

二、半导体材料的观察分析18

第三节 扫描电镜在生命学科中的应用18

一、植物学18

二、动物学21

三、医学23

四、微生物学24

五、古生物学26

六、考古学26

第四节 扫描电镜在基础学科中的应用27

一、材料学27

二、物理学29

三、化学29

第五节 扫描电镜在工业中的应用30

一、半导体工业30

二、陶瓷工业31

三、化学工业31

四、地质矿物学32

五、食品科学33

第六节 X射线微区成分分析技术的应用33

一、在生物学领域中应用34

二、在材料科学中的应用34

三、特殊试样的应用35

第七节 电镜成分分析技术的发展前景36

第三章 扫描电镜的工作原理和结构38

第一节 工作原理和主要结构38

一、工作原理38

二、主要结构38

第二节 扫描电镜成像原理和成像过程42

一、成像原理42

二、成像过程42

三、扫描电镜的特点45

第三节 影响扫描电镜图像形成和图像质量的因素46

一、影响图像形成的因素46

二、影响图像细节清晰的因素48

三、影响图像反差的因素50

第四章 透射电镜的工作原理和结构51

第一节 透射电镜的工作原理和主要结构51

一、透射电镜的工作原理51

二、透射电镜的结构51

第二节 透射电镜的成像原理55

一、透射电镜的成像原理可分为三种情况56

二、透射电镜图像反差的形成原理56

三、提高生物样品图像反差的方法58

四、透射电镜的特点59

第三节 电子显微镜与光学显微镜的主要区别60

一、成像原理和反差来源60

二、分辨本领和放大倍数60

三、视野、景深和焦深61

四、样品制备6

五、样品的损伤和污染61

第五章 扫描电镜样品制备技术63

第一节 对样品处理的要求65

一、研究样品表面要处理干净65

二、研究样品必须彻底干燥65

三、非导体样品的导电处理66

四、保护样品研究面66

五、要求标记物要有形态66

第二节 取样、清洗、固定67

一、取样67

二、粗样清洗67

三、样品固定68

第三节 脱水74

一、脱水剂74

二、脱水的原理与要求74

三、脱水方法75

第四节 干燥75

一、干燥要求75

二、干燥方法75

第五节 粘样82

一、粘样的目的82

二、粘贴样品的材料82

三、注意事项82

第六节 样品的导电处理82

一、金属镀膜法83

二、导电染色法85

第六章 透射电镜样品制备技术86

第一节 概述86

一、电镜样品取材的基本要求86

二、样品超薄切片的基本要求86

三、主要制样技术86

第二节 样品取材与固定88

一、取材方法88

二、固定89

第三节 样品的清洗与脱水91

一、清洗91

二、脱水91

第四节 样品的渗透、包埋与聚合92

一、渗透92

二、包埋92

三、渗透与包埋的操作步骤93

四、渗透与包埋中的注意事项93

五、聚合93

第五节 载网和支持膜的制作94

一、载网的类型和选择94

二、支持膜的制作95

第六节 样品的超薄切片技术97

一、切片刀制作97

二、修块98

三、切片99

第七节 切片的染色102

一、染色剂的种类102

二、常用染色剂的特性103

三、常用染色剂的配制103

四、染色方法103

五、切片染色常出现效果欠佳的原因及克服方法104

第八节 负染色技术104

一、负染色的原理104

二、负染色剂的种类及其特性105

三、负染样品悬浮液的制备106

四、负染的方法与操作步骤107

五、影响负染色效果的主要因素及克服方法108

六、正染与负染的区别108

第九节 电镜细胞化学技术109

一、电镜细胞化学技术种类109

二、电镜酶细胞化学技术109

三、其他生化物质的细胞化学技术113

第十节 免疫电子显微技术116

一、抗体的标记技术116

二、胶体金制备116

三、胶体金的鉴定117

四、胶体金探针制备方法117

五、胶体金免疫电镜样品的制备119

六、对照实验121

七、胶体金探针的优点122

第十一节 实验废液处理122

一、废液的收集122

二、废液的处理123

三、废液处理的注意事项125

第七章 扫描电镜的使用126

第一节 扫描电镜的操作126

一、电镜启动126

二、样品的安装126

三、观察条件的选择126

四、观察图像的操作方法127

五、关机130

第二节 扫描电镜图像常出现的质量问题130

一、产生的原因130

二、损伤132

三、污染133

四、放电133

第八章 透射电镜的操作134

第一节 透射电镜的一般操作步骤134

一、TEM的开机134

二、TEM的对中和调整134

三、装样及注意事项139

四、图像的观察和记录139

五、关机140

第二节 电镜日常使用期间的检查与保养140

一、技术指标的调整140

二、日常保养工作141

第九章 电子图像储存技术和计算机处理142

第一节 计算机储存电子图像142

一、计算机储存图像的特点142

二、全自动图像处理技术142

第二节 计算机图像处理实例143

一、电子图像的计算机处理过程143

二、实空间图像的处理144

三、傅里叶空间图像的处理144

四、二维晶体图像的处理145

五、螺旋对称颗粒图像的处理147

六、单颗粒图像的处理148

七、二十面体对称的病毒颗粒图像的处理150

第十章 电镜样品制备实例152

第一节 生物样品扫描电镜制备方法152

一、孢子常规的固定方法152

二、酵母的固定152

三、原生动物固定153

四、植物组织的特殊固定方法153

五、单固定快速脱水法154

六、鱼类细胞单固定半程序微波辐射法155

七、贴壁培养细胞的单固定氯化金染色法155

八、血细胞制样方法155

九、血细胞E花环样品制备156

十、明胶膜收集游离细胞制样方法157

十一、单细胞藻类的制样方法157

十二、菌落制样方法158

十三、细菌液体培养物制样方法158

十四、真菌熏蒸制样方法159

十五、微小样品的制样方法159

十六、原生质体的制样方法159

十七、染色体的制样方法160

十八、植物花粉粒的制备技术161

十九、叶表皮制样方法163

二十、木材立方体扫描样品制备技术164

二十一、植物材料的冷冻割断制备技术165

二十二、动物细胞内部结构冷冻割断法166

二十三、动物器官的制样方法166

二十四、细胞盐酸化学消化法167

二十五、线虫扫描电镜样品的制备168

二十六、针插或乙醇浸泡标本的样品制作171

二十七、扫描电镜样品的导电法172

二十八、非包埋与包埋切片的样品处理方法173

二十九、免疫扫描电镜方法176

三十、微区成分分析的生物样品制备方法180

第二节 非生物样品扫描电镜制备技术180

一、块状导电样品制备180

二、粉末样品制备180

三、土壤试样的制备182

第三节 生物样品透射电镜制备方法182

一、蛋白质样品的负染色182

二、核酸样品的负染色183

三、水稻条纹病毒（RSV）的提纯185

四、免疫电镜技术包埋前染色方法185

五、免疫电镜技术包埋后染色方法186

六、免疫铁蛋白标记技术186

七、免疫酶标记技术187

八、悬浮态抗原的免疫标记技术187

九、藻类透射电镜制样方法188

十、散在细胞的透射电镜制样方法189

十一、血小板透射电镜样品制备方法190

十二、孢粉包埋切片法190

十三、花药包埋切片法190

十四、整花包埋切片法191

十五、静脉乳液样品的制备191

十六、纳米材料乳液制备191

十七、细胞钙离子定位的锑酸盐沉淀技术192

十八、三磷酸腺苷酶的定位192

十九、组胞色素氧化酶的定位193

二十、过氧化物酶的定位193

二十一、过氧化氢酶的定位193

二十二、葡萄糖—6—磷酸酶的定位194

二十三、显示DNA的染色法194

二十四、提高超薄切片反差的双铅染色法194

二十五、超薄切片的选择性染色法195

二十六、显示蛋白的氨银反应195

二十七、细胞质多角体病毒的分离与纯化195

二十八、染色质核小体的透射电镜样品制备196

二十九、植物花叶病毒的免疫电镜观察196

三十、造纸胶料的制备197

第四节 非生物样品透射电镜制备技术197

一、粉末样品的制备197

二、薄膜样品的制备198

三、复型200

四、界面试样的制备202

五、聚焦离子束方法202

六、真空蒸涂方法202

七、试样的保存和观察时的注意事项203

参考文献204